蛋白定性分析 与突变位点的鉴定  

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定性分析

胶条鉴定、胶点鉴定

蛋白胶点、胶条鉴定是目前使用最广泛的蛋白质组学研究手段,用双向电泳(Two-dimensional gel electrophoresis2-DE)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGESodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)分离蛋白质混合物,收集目的蛋白质胶点和胶条,经胶内酶解后用于质谱分析以获得蛋白质信息。
  我们采用MS/MS技术进行蛋白胶点、胶条鉴定,并对胶内酶解法进行系列优化,显著提高了蛋白质胶内酶解的质谱鉴定成功率和肽段覆盖率。

 

表观遗传学修饰位点鉴定

蛋白质的表观遗传学修饰在调节蛋白质活性中起着非常重要的作用,特别是磷酸化修饰、乙酰化修饰、泛素化修饰与甲基化修饰。这些修饰的蛋白仅占总蛋白极少的量,如磷酸化修饰仅占同一种蛋白总量的1%左右,修饰位点的改变或修饰量的微小改变对活性调节起重要的作用。我们提供单一蛋白上的修饰位点的鉴定服务,同时,通过对总蛋白中修饰片段进行富集,用TMT进行标记,通过测定修饰片段的类型与丰度,可比较出总蛋白中那些蛋白的修饰量发生了改变。这对系统研究不同处理条件下胞内那些信号通路发生了激活与失活提供了条件,通过以时间为单位取样,可鉴定信号通路激活与失活的先后顺序。

 

未知蛋白与突变位点的鉴定

对未知蛋白的鉴定包括对有差异表达的蛋白的鉴定、有差异修饰的蛋白的鉴定以及新筛选到的未知互作蛋白的鉴定。只需要提供相关蛋白的SDSPAGE胶条或总的蛋白即可。